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深孔板磁套使用全攻略:选型、操作与常见问题
深孔板磁套是核酸提取实验中的核心工具,其选型、操作规范及问题处理直接影响实验效率和数据准确性。以下结合技术原理和实操经验,为您提供系统指南。
一、选型要点
孔型与材质选择
核酸提取:优先选择黑色聚丙烯(PP)材质、U型底深孔板,可提升磁珠回收率并减少损失。
细胞培养:需锥形孔底设计,降低剪切力并促进气体交换。
样品储存:需耐受-80℃低温,PP材质密封性更优。
规格匹配
根据样品量选择孔数(如96孔板适合高通量,384孔板适合超高通量)。
磁套需与深孔板孔型匹配,确保磁棒运动时无偏移。
二、操作流程
样本裂解
将样本、裂解缓冲液、蛋白酶K加入深孔板,震荡混匀使DNA结合磁珠。
磁珠分离
将深孔板置于磁力架,1分钟内完成磁珠吸附,弃上清保留磁珠。
洗涤与洗脱
加入洗涤缓冲液,震荡悬浮磁珠后再次吸附,重复2次。
最后用洗脱液释放DNA,完成提取。
三、常见问题与解决
问题现象 可能原因 解决方案
磁珠回收率低 孔底不平整或磁套偏移 更换U型底深孔板,检查磁套安装
交叉污染 磁套未清洁 使用后立即用75%酒精消毒,定期更换老化磁套
液体残留 真空压力过大或吸头刺穿膜 控制压力≤5mmHg,沿孔壁加样
四、维护建议
清洁:实验后立即用去离子水冲洗,避免磁珠残留。
储存:干燥避光环境存放,避免高温变形。
寿命:磁套磨损或磁力下降时需更换,建议每500次实验检查一次。
通过合理选型、规范操作和定期维护,深孔板磁套可显著提升核酸提取的稳定性和通量。若需进一步了解自动化设备操作,可参考ST8800全自动核酸提取仪说明书。
注:以上仅供参考,不作为实际数据,实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
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